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血液DNA提取試劑盒實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及注意事項(xiàng)說(shuō)明
瀏覽次數(shù):2479發(fā)布日期:2021-01-22
  血液是與所有器官都有接觸的組織,蘊(yùn)藏著大量寶貴信息。早前人們開發(fā)了血液活檢技術(shù)。用來(lái)分析循環(huán)腫瘤DNA、檢測(cè)血液中完整的腫瘤細(xì)胞和收集由腫瘤細(xì)胞釋放出的外泌體。還可以分析血液樣本中的腫瘤DNA,并對(duì)癌癥的基因特點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。隨著基因測(cè)序技術(shù)的快速發(fā)展,血液活檢技術(shù)以其迅速、便捷、損傷性小等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)逐步應(yīng)用于臨床。用來(lái)監(jiān)測(cè)腫瘤的術(shù)后反應(yīng),預(yù)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)。還能夠協(xié)助醫(yī)生發(fā)現(xiàn)患者的無(wú)任何癥狀的早期腫瘤。
 
  血液DNA提取試劑盒可從新鮮或冷凍的抗凝血中提取人類的或哺乳動(dòng)物的基因組DNA。整個(gè)提取過(guò)程不涉及酚等試劑,提取的血液基因組片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,配合高通量的全自動(dòng)核酸提取儀,可實(shí)現(xiàn)DNA的自動(dòng)化提取。
 
  血液DNA提取試劑盒在操作的時(shí)候,無(wú)需加熱,室溫(15-25℃)下即可進(jìn)行全程操作,提取結(jié)果可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、熒光定量PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交,芯片檢測(cè)、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
 
  實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng):
 
  1、向蛋白酶K中加入用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K儲(chǔ)存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K勿長(zhǎng)時(shí)間室溫放置,避免反復(fù)凍融,以免影響其活性。
 
  2、所有離心操作均在室溫下完成。
 
  3、血液樣品反復(fù)凍融,會(huì)導(dǎo)致提取的DNA的片段較小且提取量下降。所得基因組DNA也應(yīng)盡可能避免反復(fù)凍融,以免降解。如果提取冷凍血液的基因組DNA,建議37℃水浴,迅速解凍后再進(jìn)行后續(xù)操作。
 
  4、血液樣品的儲(chǔ)存:
 
  1)短期保存:已加入抗凝劑的血液樣品可在2~8℃儲(chǔ)存到10天,對(duì)于某些實(shí)驗(yàn)例如Southern雜交等,需要得到完整全長(zhǎng)的基因組DNA,請(qǐng)將血液樣品在2~8℃儲(chǔ)存不超過(guò)3天,此時(shí)基因組DNA的降解程度較輕。
 
  2)長(zhǎng)期保存:已加入抗凝劑的血液請(qǐng)置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA,推薦使用EDTA作為抗凝劑)。
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